Родился 14 июня 1968 года в городе Нефтекамск (Республика Башкортостан), в семье водителя-дальнобойщика и заведующей детского сада. В 1975 году семья переехала на Ямал в Надым.
В детстве Владимир увлекался фотографией, театром, авиамоделированием. Окончив школу, поступил в филиал ленинградского «Политеха», расположенный в Пскове. После первого курса добровольно отправился на срочную службу, несмотря на отличную учебу, так как понял, что профессия инженера – не его призвание. В 1988 году поступил в Тюменский государственный университет, который окончил в 1993 году с дипломом специалиста-правоведа.
Трудовой путь начал с должности юристконсульта в Западно-Сибирском коммерческом банке Ямало-Ненецкого отделения. Уже через год он был повышен до должности и.о. руководителя, а 24 января 1995 года Якушев занял пост директора банка.
С 19 мая 1997 года Владимир Якушев – вице-президент банка – директор Салехардского отделения ОАО «Запсибкомбанк». В этом же году он получил высшее экономическое образование в Тюменском государственном университете. Год спустя Якушев назначен президентом ОАО «Запсибкомбанк».
Политическая карьера Владимира Якушева началась с 13 июня 2001 года, когда он заступил на пост вице-губернатора Тюменской области при губернаторе Сергее Собянине. В июне 2002 года Якушев вошел в Совет директоров ОАО «Тюменьэнерго». В начале марта 2005 года занял должность первого заместителя главы Тюмени, а уже 21 числа того же месяца был назначен и.о. главы города. Полгода спустя, 24 ноября 2005 года, состоялась инаугурация Якушева как губернатора Тюменской области. В декабре того же года он защитил диссертацию и получил ученую степень кандидата экономических наук.
1 октября 2007 года Якушев вошел в Высший совет партии «Единая Россия». Ровно три года спустя президент Дмитрий Медведев наделил Владимира Якушева губернаторскими полномочиями на 5-летний срок. В выборах от 14 сентября 2014 года был переизбран на этот пост.
В 2014 году Владимир Якушев запустил проект «Медицинский город» по интеграции медицинских лечебных заведений в единый медицинский комплекс с общей транспортной, инженерной, коммуникационной и социальной инфраструктурой. В октябре 2015 года Фонд развития гражданского общества разместил рейтинг эффективности губернаторов, в котором Владимир Якушев занял первое место.
За время работы Владимира Владимировича в регионе было построено более 20 крупных производств, из них 5 имели иностранный приток капитала; было создано более 4 тысяч рабочих мест. В Тюменской области выросли темпы строительства, нефтедобычи, усовершенствован весомый процент инфраструктуры. Также губернатор активно развивал культуру в городе и сельской местности, реставрируя музеи, и открывая дворцы культуры.
В мае 2018 года премьер-министр Дмитрий Медведев выдвинул кандидатуру Владимира Якушева на пост главы Министерства строительства.
Звание «Почетный гражданин города Тюмени» присвоено Владимиру Владимировичу Якушеву в 2018 году.